质粒DNA的提取和酶切；                             琼脂糖凝胶电泳检测DNA；

PCR基因扩增；                                              目的片段回收；

大肠杆菌感受态细胞的制备及转化；          DNA重组（连接反应）；

重组克隆的鉴定（Southern Blot 或酶切鉴定等）；

外源基因在大肠杆菌中的诱导表达；          SDS-PAGE；